制備液相保護(hù)柱是一個涉及多個步驟的精細(xì)過程，其主要目的是保護(hù)色譜柱，延長其使用壽命，并確保分析結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。以下是制備液相保護(hù)柱的一般步驟和注意事項(xiàng)：
 

　　一、制備步驟
 

　　1.材料選擇與準(zhǔn)備
 

　　填料選擇：保護(hù)柱的填料應(yīng)與色譜柱的填料相匹配，以確保相似的分離性能和兼容性。常見的填料包括硅膠、氧化鋁、C18等。
 

　　篩板準(zhǔn)備：保護(hù)柱柱芯的兩端各有一個篩板，用于過濾流動相和樣品中的微粒污染物。篩板的孔徑應(yīng)小于色譜柱篩板的孔徑。
 

　　2.柱體組裝
 

　　將選定的填料裝入柱體中，確保填料均勻且緊密。
 

　　在柱體的兩端安裝篩板，并固定好。
 

　　3.預(yù)洗與平衡
 

　　使用與后續(xù)實(shí)驗(yàn)相同的流動相對保護(hù)柱進(jìn)行預(yù)洗，以去除柱子中的殘留物并穩(wěn)定柱子的性能。
 

　　確保流動相在保護(hù)柱內(nèi)達(dá)到吸附平衡，以提高分離效果。
 

　　4.連接與測試
 

　　將制備好的保護(hù)柱連接到色譜系統(tǒng)中，通常位于色譜柱之前。
 

　　進(jìn)行系統(tǒng)測試，檢查保護(hù)柱的密封性、流速和分離效果等。
 

　　二、注意事項(xiàng)
 

　　1.填料選擇與色譜柱匹配
 

　　保護(hù)柱的填料應(yīng)與色譜柱的填料相同或相似，以確保相似的分離性能和兼容性。
 

　　2.篩板孔徑選擇
 

　　篩板的孔徑應(yīng)小于色譜柱篩板的孔徑，以有效攔截可能堵塞色譜柱篩板的顆粒。
 

　　3.流速控制
 

　　避免超過保護(hù)柱的最大流速，以防止損壞柱子的填充材料并影響其壽命和分離效果。
 

　　4.pH范圍控制
 

　　使用符合保護(hù)柱pH范圍的溶劑和緩沖液，以避免破壞柱子的填充材料。
 

　　5.樣品前處理
 

　　在樣品進(jìn)入保護(hù)柱之前進(jìn)行前處理，如過濾、離心等，以去除樣品中的雜質(zhì)和顆粒。
 

　　6.定期維護(hù)與更換
 

　　定期對保護(hù)柱進(jìn)行物理清洗、沖洗以及檢查密封件等維護(hù)工作。
 

　　當(dāng)保護(hù)柱的分離效果明顯下降時，應(yīng)及時更換新的保護(hù)柱。